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甲型流感病毒核酸檢測試劑盒

更新時間:2024-07-05

簡要描述:

甲型流感病毒核酸檢測試劑盒的原理是通過擴(kuò)增病毒基因組中的特定區(qū)域,將其轉(zhuǎn)化為可以檢測的數(shù)量級,并使用熒光探針或其他方法檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的存在與否。

型號:YZ-P3566點擊量:1211
品牌其他品牌貨號YZ-P3566
規(guī)格50T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途僅供科研應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合

甲型流感病毒核酸檢測試劑盒的原理是通過擴(kuò)增病毒基因組中的特定區(qū)域,將其轉(zhuǎn)化為可以檢測的數(shù)量級,并使用熒光探針或其他方法檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的存在與否。具體來說,該測試劑盒通常使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),利用逆轉(zhuǎn)錄酶將病毒RNA轉(zhuǎn)錄成相應(yīng)的DNA,在PCR過程中,使用特異性引物擴(kuò)增目標(biāo)DNA序列,結(jié)合熒光探針進(jìn)行實時熒光定量檢測。如果樣本中存在甲型流感病毒的DNA,則會產(chǎn)生熒光信號,證明樣品呈陽性結(jié)果。

如需索要詳細(xì)說明書請聯(lián)系客服。

試劑組成:

包裝規(guī)格

50T/盒

反應(yīng)液

500μL×2管

酶液

50μL×1管

陽性質(zhì)控品

50μL×1管

陰性質(zhì)控品

250μL×1管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

儲存條件及有效期:

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過5次,有效期12個月。

適用儀器:

ABI、安捷倫MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列熒光定量PCR檢測儀。

標(biāo)本采集:

適用于人體的血液、體液和棉拭子等多種樣本。

保存和運(yùn)輸:

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

甲型流感病毒核酸檢測試劑盒使用方法:

1.  樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1樣本前處理

血液、體液和棉拭子樣本取100μL于1.5mL滅菌離心管中。

1.2核酸提取

推薦采用上海研尊生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進(jìn)行核酸提取, 請按照試劑說明書進(jìn)行操作。

2.  試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照;反應(yīng)管數(shù)每滿10份,多配制1份),每測試反應(yīng)體系配制如下表:

試劑CB反應(yīng)液酶液用量(樣本數(shù)為N) 20μL,1μL將混合好的測試反應(yīng)液分裝到PCR反應(yīng)管中,21μL/管。

3.  加樣(樣本處理區(qū))

將步驟1提取的核酸、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))

4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量PCR儀反應(yīng)槽內(nèi)。

4.2設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為25μL;

熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI系列儀器請勿選擇ROX參比熒光,選擇None即可。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:

步驟循環(huán)溫度時間收集熒光信號

1 1 cycle 95℃ 10min 否

2 40 cycles

94℃ 15sec 否

55℃ 30sec 是

5.  結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置Baseline和Threshold:一般直接按機(jī)器自動分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline的start值(一般可在3~15范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop值(一般可在5~20范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及Threshold的Value值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。

5.2結(jié)果判斷

陽性:檢測通道Ct值≤35,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線;

可疑:檢測通道35值≤38,建議重復(fù)檢測,如果檢測通道仍為35值≤38,且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。

6.  質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:Ct值>38或無Ct值;

陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期,且Ct值≤32;

以上條件應(yīng)同時滿足,否則實驗視為無效。

7. 檢測方法的局限性

1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;

3.陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;

4.病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

5.不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

6.試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;

7.本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

注意事項:

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

7.實驗完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進(jìn)行處理。

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TEL:18101607379

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